產(chǎn)品名稱:標準參考物質(zhì) NIST SRM 2372a - 人DNA定量標準
英文名稱:Human DNA Quantitation Standard
品牌:美國NIST標準物質(zhì)
運輸信息:干冰
產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 貨期 | 銷售價 | 您的折扣價 |
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SRM 2372a | 3 vials x 55 μL | 6周 | 13170 | 立即咨詢 |
NIST SRM 2372a - 人類 DNA定量 旨在用于人類基因組脫氧核糖核酸 (DNA) 定量材料的價值分配,主要用于定量聚合酶鏈反應(yīng) (qPCR)。
一個標準物質(zhì) NIST SRM 2372a 單元由三種在 pH 8.0 水性緩沖液中充分表征的人類基因組 DNA 材料組成。這些成分來自人類血沉棕黃層樣本并標記為 A、B 和 C。成分 A 由來自單個男性供體的基因組 DNA 組成。組分 B 由來自單個女性供體的基因組 DNA 組成。組分 C 由基因組 DNA 的重量混合物組成(1 份男性供體對 3 份女性供體)。一個 SRM 單元由一個裝有每種成分的 0.5 mL 無菌小瓶組成,每個小瓶中含有大約 55 μL 的 DNA 溶液。這些小瓶中的每一個都貼有標簽,并用顏色編碼的螺帽密封。
認證值:
認證值在表 1 中提供。這些認證值是根據(jù)液滴數(shù)字聚合酶鏈反應(yīng) (ddPCR) 對八條染色體上十個獨特目標的測定計數(shù)、稀釋因子和液滴體積測量值確定的。 NIST 認證值是 NIST 對所有已知或可疑的偏差來源都已考慮在內(nèi)的最高置信度的值。
表 1. NIST SRM 2372a - 人類 DNA定量 (a) 數(shù)量和質(zhì)量濃度的認證值 拷貝數(shù)值在計量上可追溯到自然單位計數(shù) 1 和比率 1 以及國際單位制 (SI) 導(dǎo)出的體積單位。 DNA 質(zhì)量濃度值在計量學(xué)上可追溯到自然單位計數(shù)和比率 1 以及 SI 導(dǎo)出的質(zhì)量和體積單位。
(a) 值表示為 x ± U95%(x),其中 x 是認證值,U95%(x) 是認證值的擴展不確定度。分析物的真實值被認為位于區(qū)間 x 內(nèi) ± U95%(x),置信度為 95%。 要傳播這種不確定性,請將認證值視為具有平均值 x 和標準偏差 U95%(x)/2 的正態(tài)分布隨機變量。
(b) 拷貝數(shù)濃度值、每納升人類單倍體基因組當量 (HHGE) 是基于八條染色體上十個獨特目標的液滴數(shù)字 (ddPCR) 分析計數(shù)、稀釋因子和液滴體積測量值。
(c) 質(zhì)量濃度值,即每微升人類基因組 DNA 的納克數(shù),是根據(jù)數(shù)量濃度結(jié)果、參考 HHGE 中核苷酸堿基對 (bp) 的數(shù)量以及核苷酸單體鈉鹽的平均分子量計算得出的 包含 DNA 聚合物。
非認證值:
表 2 列出了 SRM 2372a 組件中線粒體基因組 (mtDNA) 數(shù)量相對于核單倍體基因組 (nDNA) 數(shù)量的值。 由于它們基于數(shù)量有限的獨立 ddPCR 檢測,因此這些值不符合 NIST 的認證標準,但卻是目前可用的最佳估計值。
儲存和處理:
在需要使用之前,NIST SRM 2372a - 人類 DNA定量 應(yīng)儲存在 2 °C 至 8 °C 之間的黑暗中。在取出樣品等分試樣進行分析之前,組分小瓶應(yīng)簡單混合并離心(不打開小瓶蓋)。為使認證值適用,打開小瓶后應(yīng)立即取出材料并立即處理。認證值不適用于重新封蓋的小瓶中剩余的任何材料。該認證僅適用于初次使用,如果以后使用剩余材料,則不能保證相同的結(jié)果。
用途:
對于 qPCR 分析,根據(jù)認證的質(zhì)量濃度分配二級標準 DNA 溶液的值。使用由 SRM 2372a 組件制備的一個或多個稀釋系列,將檢測校準到 SRM 2372a。對于非性別特異性 qPCR 檢測,所有三種成分都應(yīng)用作校準物,以闡明潛在的材料檢測特異性相互作用。用戶應(yīng)記住存在移液錯誤的可能性;因此,在制備校準溶液時應(yīng)適當小心。
安全性:
用于制備本產(chǎn)品的每個供體單位都經(jīng)過 FDA 許可的測試,發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒(HIV-1 RNA 和抗 HIV 1/2)、乙型肝炎(HBV DNA 和 HBsAg)呈陰性、丙型肝炎(HCV RNA和抗HCV)、西尼羅河病毒(WNV RNA)和梅毒。此外,根據(jù) FDA 對克氏錐蟲(南美錐蟲)的指導(dǎo)方針對每個捐贈者進行了測試,發(fā)現(xiàn)它們呈陰性/無反應(yīng)。然而,沒有已知的測試方法可以完全保證這種材料中不存在傳染性病原體。因此,這種基于人類血液的產(chǎn)品應(yīng)按照生物安全級別 1 進行處理。SRM 2372a 組件和衍生溶液應(yīng)按照當?shù)?、州和?lián)邦法規(guī)進行處理。
來源:
NIST SRM 2372a - 人類 DNA定量 是在 NIST 進行適當?shù)娜祟愂茉囌哐芯看_定后開發(fā)的。