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NIBSC 06/202人乳頭瘤病毒16型標(biāo)準(zhǔn)品 (HPV16) DNA

作者:東莞市中億生物科技有限公司   日期:2023-02-24

1. 預(yù)期用途

NIBSC 06/202 人乳頭瘤病毒16 型標(biāo)準(zhǔn)品用于 HPV 16 型 (HPV16) DNA 的第一個國際標(biāo)準(zhǔn)基于核酸的測定由冷凍干燥的制備物組成含有全長 HPV16 DNA 的重組質(zhì)粒 pBR322 被克隆通過其獨特的 BamH1 站點 (Quint et al., 2006)。該標(biāo)準(zhǔn)已在純化的人類基因組 DNA 的背景下配制,凍干在 0.5 ml 等分試樣中并儲存在 -20 °C。材料經(jīng)過校準(zhǔn)涉及 19 個實驗室的國際合作研究(Wilkinson 等人,2010)。國際標(biāo)準(zhǔn)包含的材料是專有的第三方,應(yīng)僅用于內(nèi)部校準(zhǔn)或HPV-16擴增檢測的工作標(biāo)準(zhǔn)脫氧核糖核酸。國際標(biāo)準(zhǔn)不應(yīng)用于任何其他用途,使用后應(yīng)丟棄。



2. 注意
NIBSC 06/202 人乳頭瘤病毒16 型(標(biāo)準(zhǔn)品)不適用于人類食物鏈中的人類或動物。

該材料含有源自 C33A 細胞的 DNA。與所有生物來源的材料一樣,這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時應(yīng)小心謹慎,以免割傷。


3. 單元

HPV16 DNA 的NIBSC 06/202 人乳頭瘤病毒16 型標(biāo)準(zhǔn)品已規(guī)定為每安瓿 5 x 10^6 國際單位 (IU) 的單位。


用于 HPV 16 型 DNA 的第一個國際標(biāo)準(zhǔn)(NIBSC 代碼 06/202)的散裝材料配方:

在 NIBSC,根據(jù)公式制備大量 HPV16 質(zhì)粒 DNA 材料:

HPV GEq/ml 散裝材料 = (HPV GEq/ml 質(zhì)粒原液 x 體積質(zhì)粒原液)/體積散裝材料。

因此,HPV16 GEq/ml 散裝材料 = (8.547 x 1011 HPV-16 GEq/ml 質(zhì)粒原液)x(0.02223 ml HPV-16 質(zhì)粒原液)/1900 ml HPV-16 散裝材料 = 1.0 x 107 HPV-16 GEq/ml散裝材料 HPV-16 DNA 散裝材料隨后以 0.5 ml 等分試樣冷凍干燥。

第一次將 IU 等同于 GEq 需要某些假設(shè)HPV16 DNA 的國際標(biāo)準(zhǔn):

1) HPV16 的 1.0 x 1011 GEq/ml 等于 1.17 ng/μl。

2) 凍干后 HPV16 DNA 的活性沒有損失。

3) 重組HPV-16質(zhì)粒DNA準(zhǔn)確模擬了生物樣本中HPV16病毒DNA的活性。


獨立計算重組 HPV-16 質(zhì)粒的 GEq/ml脫氧核糖核酸。

NIBSC 還使用 BioEdit 序列比對編輯器 v7.0.5.3 (Tom Hall, Isis 制藥公司,美國)。用于確定分子量的序列是用于 pBR322 的 GenBank 登錄號 J01749.1 和用于 HPV16 的參考序列(登錄號 K02718)。


4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國:英國。每個安瓿含有相當(dāng)于 0.5 ml HPV16 的凍干粉質(zhì)粒 DNA 在 10mM Tris 緩沖液 pH7.4 中含有 1mM EDTA、5 mg/ml 海藻糖和 ~1 x 106 人 Geq/ml 源自 C33a 細胞。



5. 存儲

收到時,NIBSC 06/202 人乳頭瘤病毒16 型標(biāo)準(zhǔn)品安瓿瓶應(yīng)存放在 -20 °C 或以下。請注意:由于凍干材料固有的穩(wěn)定性,NIBSC 可能會在環(huán)境溫度下運輸這些材料。


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