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CRM-ATX 魚腥藻毒素a標準溶液

作者:東莞市中億生物科技有限公司   日期:2023-06-07

CRM-ATX 魚腥藻毒素a標準溶液Anatoxin-a(ATX-a)是一種藍藻毒素,與北美[1]和全球[2]的動物死亡有關。CRM-ATX是一種經(jīng)認證的校準液,用于協(xié)助分析人員測定ATX-,每個安瓿中含有大約0.5毫升的ATX-a,以0.01%的乙酸溶解在甲醇水中(9:91,Viv)。



CRM-ATX是一種校準溶液標準物質(CRM),用于ATX-A的分析方法開發(fā)和精確定量。CRM濃度使其適合于制備用于儀器校準的稀釋系列,如用紫外吸收法(LC-UV)、熒光法(LC-FL)或質譜法(LC-MS)檢測的液相色譜,以及用于回收實驗的控制樣品。


ATX的準備

ATX-a是從一種異青藤的藻類培養(yǎng)物中分離得到的。從細胞中提取毒素,經(jīng)層析純化后,真空干燥至無水形態(tài)[4.5]。將純化的ATX-a溶于9:91的脫氣甲醇中,用0.01%的乙酸溶解制得CRM溶液。溶液與聚四氟乙烯包覆攪拌棒和磁混合器完全混合,在氬氣下攪拌.在琥珀玻璃安瓿中預先加入氬,然后立即進行火焰密封,每個安瓿中含有約0.5毫升的溶液。


同質性:由于CRM-ATX 魚腥藻毒素a標準溶液是一個真正的解決方案,所以安瓿之間的變化應該很小。然而,大約0.8%的安瓿是隨機選擇的,ATX-a濃度是用LC-UV測量的。安瓿之間的變化不大于對一種溶液進行復制分析時的變化,因此在整個安瓿范圍內表現(xiàn)出可接受的同質性。


穩(wěn)定性研究:已進行了廣泛的研究,以確定CRM-ATX 魚腥藻毒素a標準溶液在各種條件下的穩(wěn)定性。ATX-a在堿性溶液中不穩(wěn)定,對光敏感[10]。對以前的ATX-a制劑的可行性研究表明,貯存在+4°C的水溶液-儲存酸化甲醇/水的溶液具有良好的長期穩(wěn)定性。在幾種溫度(-80°C,-20°C,+4°℃,+25 C和+37°C)下,對CRM-ATX進行了長期穩(wěn)定性研究。ATX--在-20°C儲存,在+4°C下分解小于3%,10天后在+37°C保存時,其降解率小于2%。

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結構確認和純度評估

采用500 MHz核磁共振譜、LC-MS[6J,LC-UV]、毛細管電泳-紫外檢測(CE-UV)[7]和液相色譜-化學發(fā)光氮檢測(LC-CLND)[8]等技術對該毒素的純度進行了檢測。用核磁共振[9]和四極飛行時間(QToF)質譜確證了ATX-a的分子結構.[M+H]~*離子在166.12269Da,在理論單同位素質量166.12264 Da(=0.30ppm)的0.05MDA范圍內,獲得了[M+H]~*離子的串聯(lián)質譜譜,如圖2.NMR、LC-MS、LC-UV和LC-CLND所示,未觀察到主要雜質。



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