扇貝毒素-2CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品(Pecteno毒素,PTXs)是一組由多個(gè)甲藻種產(chǎn)生的聚醚內(nèi)酯類(lèi)毒素,如丁藻和丁藻[1,2]。PTX與腹瀉性貝類(lèi)中毒有關(guān),這是因?yàn)樗鼈冊(cè)谪愵?lèi)和浮游生物中與岡田酸類(lèi)共存,并通過(guò)腹腔注射對(duì)小鼠有毒性。然而,它們還沒(méi)有被證實(shí)對(duì)小鼠具有口服毒性,也沒(méi)有與人類(lèi)疾病有牽連[3]。無(wú)倫理的PTX由歐盟在160μglkg的組織當(dāng)量中與岡田酸和二茶堿結(jié)合[4]。CRM-PTX2-b是經(jīng)認(rèn)證的PTX 2在甲醇中的校準(zhǔn)液,濃度為5.13μmol L。
扇貝毒素-2CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品是一種經(jīng)認(rèn)證的校正液,用于分析方法的開(kāi)發(fā)和PTX 2的準(zhǔn)確定量。CRM-PTX2-b的濃度使其適合于制備液相色譜(LC)和液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)儀器校準(zhǔn)的稀釋液系列,也適用于貝類(lèi)對(duì)照樣品的回收實(shí)驗(yàn)。
PTX 2是新西蘭Cawthron研究所從浮游植物水華中分離到的一種植物。2001年2月初,這些浮游植物在離新西蘭布勒灣海岸3-4公里的地方被凈化,并按照前面的描述[2]進(jìn)行了一系列色譜步驟的凈化。用純化的PTX 2在CDs0H(~4mm)中溶解制得原液。然后用定量NMR[5]測(cè)定了該原液中PTX 2的濃度,然后將PTX 2原液準(zhǔn)確地稀釋在經(jīng)氣處理的高純甲醇中,制成終容為2 L的PTX 2原液。該溶液與Teflon攪拌棒和磁混合器混合,在氬氣條件下冷卻于冰浴中。阿利古特被分配到琥珀玻璃安瓿和火焰密封在Argonle下,然后被標(biāo)記,包裝,并立即轉(zhuǎn)移到長(zhǎng)期儲(chǔ)存在-80℃。每個(gè)安瓿含有大約0.5毫升的溶液。
穩(wěn)定度
采用經(jīng)典的穩(wěn)定性研究設(shè)計(jì),對(duì)扇貝毒素-2CRM-PTX2-b標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào)20021127)在甲醇中的短期和長(zhǎng)期穩(wěn)定性進(jìn)行了評(píng)價(jià),用同樣的方法制備了CRM-PTX2-b,并合理地保證了其相當(dāng)?shù)姆€(wěn)定性,在30天內(nèi),PTX 2的降解時(shí)間不超過(guò)i20°C,表明具有良好的短期穩(wěn)定性。但在+37℃處理30天后,PTX 2的降解明顯,計(jì)算了各貯藏溫度下1年長(zhǎng)期穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的回歸值,并進(jìn)行了顯著性檢驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)在+4°C以下的所有條件下都不顯著。用-12°C斜率的標(biāo)準(zhǔn)誤差確定了與長(zhǎng)期穩(wěn)定性評(píng)估有關(guān)的不確定度(見(jiàn)分段不確定性)。長(zhǎng)期穩(wěn)定性引起的相對(duì)不確定度為0.77%.建議的存儲(chǔ)溫度為-12°℃.
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