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GTS40-3-2轉(zhuǎn)基因大豆ERM-BF410cp的定性PCR檢測(cè)

作者:東莞市中億生物科技有限公司   日期:2022-12-02

東莞市百順生物科技有限公司是BCR/IRMM/ERM的代理商,專業(yè)代理耐除草劑轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2 ERM-BF410cp 標(biāo)準(zhǔn)品。


在轉(zhuǎn)基因研究中,將同一種外源基因轉(zhuǎn)入不同 作物、不同品種,形成具有相同遺傳性狀的不同轉(zhuǎn)基 因品系。由于同一外源基因在不同的作物中的表達(dá) 效率不盡相同,有的研究人員便將外源基因進(jìn)行一 定修飾后再轉(zhuǎn)入受體中以提高其表達(dá)效率。這增加 了對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品品種鑒定的復(fù)雜性,也給轉(zhuǎn)基因產(chǎn) 品的檢測(cè)帶來了難度¨引。隨著生物技術(shù)的不斷發(fā) 展,轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品得到越來越廣泛的應(yīng)用而 流向市場(chǎng)。


目前。GTS40-3-2耐除草劑轉(zhuǎn)基因大豆可能已 被進(jìn)口到我國(guó)用作加工原料,我國(guó)必須加強(qiáng)監(jiān)管以 防止其在進(jìn)口、運(yùn)輸、加工或銷售過程中存在流散到 環(huán)境中的可能性。而建立轉(zhuǎn)基因大豆GTS40—3-2的 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)是進(jìn)行安全監(jiān)管的前提。雖然我國(guó)已建立 了轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)方法的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)¨L19J,但這些標(biāo) 準(zhǔn)僅針對(duì)轉(zhuǎn)基因大豆構(gòu)建特異性,其在轉(zhuǎn)基因大豆 的檢測(cè)中已逐漸顯現(xiàn)出局限性,無法依靠它精確檢 測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆品系。為解決在檢測(cè)工作中遇到的這 個(gè)問題,應(yīng)有關(guān)部門的要求,本研究建立了GTS40-3-2轉(zhuǎn)化體特異性PCR檢測(cè)技術(shù)。


本文根據(jù)已公布 的轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2的外源基因與大豆基因組 旁側(cè)序列相關(guān)信息,設(shè)計(jì)了5對(duì)品系特異性引物,從 中選取了一對(duì)特異性好、擴(kuò)增效率高的引物,優(yōu)化了 PCR反應(yīng)的引物濃度和退火溫度,建立了轉(zhuǎn)基因大 豆GTS40—3-2轉(zhuǎn)化體特異性的定性PCR檢測(cè)方法, 并驗(yàn)證了其檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆GTS40—3-2的品系特異 性,其檢測(cè)最低極限(靈敏度)可達(dá)0.05%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高 出了歐盟轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品最低標(biāo)識(shí)閾值(0.9%)。6家 國(guó)內(nèi)具有資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室對(duì)本研究建立的方法進(jìn)行循 環(huán)驗(yàn)證的結(jié)果也表明,該方法成本低、效率高,具有 特異性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn),其技術(shù)參數(shù) 能夠滿足我國(guó)轉(zhuǎn)基因生物安全管理過程中對(duì) GTS40-3-2大豆的檢測(cè)需求,具有廣泛的實(shí)用性和 良好的應(yīng)用前景。若將該技術(shù)轉(zhuǎn)化成國(guó)家技術(shù)標(biāo) 準(zhǔn),將有望成為我國(guó)轉(zhuǎn)基因大豆及產(chǎn)品成分檢測(cè)的 重要參考依據(jù),不僅能夠滿足我國(guó)轉(zhuǎn)基因生物安全 管理的需要,還可準(zhǔn)確鑒定出利用轉(zhuǎn)基因大豆 GTS40-3-2作為親本非法轉(zhuǎn)育出的衍生品種,從而 防止轉(zhuǎn)基因大豆G1Ⅸ0—3-2流散到環(huán)境中造成生態(tài) 風(fēng)險(xiǎn)。


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