轉(zhuǎn)基因大豆DAS-81419-2 ERM-BF437d是五種DAS-81419-2大豆粉末認(rèn)證參考材料(CRMs)之一,含有不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的轉(zhuǎn)基因大豆。ERM-BF437d由非轉(zhuǎn)基因大豆和轉(zhuǎn)基因DAS-81419-2大豆的全種子生產(chǎn)出來(lái),這兩種大豆均由陶氏農(nóng)業(yè)科學(xué)公司(DAS,Oxon,UK)提供。根據(jù)DAS提供的信息,用于處理轉(zhuǎn)基因大豆DAS-81419-2 ERM-BF437d種子是純合子的,是通過(guò)幾代自交受精獲得的。
規(guī)格:根據(jù)委員會(huì)法規(guī)(EC)第65/2004號(hào),DAS-81419-2大豆事件具有唯1標(biāo)識(shí)碼DAS-81419-2。轉(zhuǎn)基因大豆DAS-81419-2 ERM-BF437d采用琥珀玻璃瓶提供,其中包含至少1克大豆粉,在氬氣氣氛下包裝。
截止到 2015 年, 全球轉(zhuǎn)基因作物累計(jì)種植面 積達(dá)到 20 億 hm2 , 其中轉(zhuǎn)基因大豆種植面積 10 億 hm2 ,是種植面積最大的轉(zhuǎn)基因作物。 目前,全世界 共有涉及 26 種轉(zhuǎn)基因作物、363 個(gè)品系得到監(jiān)管機(jī) 構(gòu)的審批,可用于糧食、飼料或釋放到環(huán)境中,其中 包含 31 個(gè)轉(zhuǎn)基因大豆品系 。
轉(zhuǎn)基因作物的檢測(cè)方法主要為 PCR 、多重 PCR、 熒光定量 PCR 等,同時(shí)也有一些等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)用 于轉(zhuǎn)基因的檢測(cè),例如 LAMP 、RPA 等。而熒光定 量 PCR 由于其特異性強(qiáng)、靈敏度高、無(wú)需凝膠電泳 等優(yōu)勢(shì)應(yīng)用最為廣泛, 歐盟轉(zhuǎn)基因標(biāo)準(zhǔn)全部采用熒 光定量 PCR,我國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、出入境檢驗(yàn)檢疫行 業(yè)標(biāo)準(zhǔn)均采用熒光定量 PCR。 另外,在實(shí)際檢測(cè)過(guò) 程 中 , 在檢測(cè)某一樣品是否含有轉(zhuǎn)基因大豆 DAS81419 成分時(shí), 通常需要同時(shí)檢測(cè)大豆內(nèi)源基 因,以判斷 DNA 提取是否成功等問(wèn)題,然而由于不 在同一管內(nèi)反應(yīng),無(wú)法成功指示 PCR 反應(yīng)的假陰性 問(wèn)題,因此,有必要建立同時(shí)檢測(cè)大豆內(nèi)源基因和轉(zhuǎn) 基因大豆 DAS81419 的單管二重?zé)晒舛?PCR,以 便判斷 DNA 提取成功以及指示 PCR 反應(yīng) 假 陰 性 等問(wèn)題, 提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。 本研究旨在建立一套 同時(shí)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因大豆 DAS81419 和大豆內(nèi)源基因 Lectin 的單管二重?zé)晒舛?PCR, 為出入境檢驗(yàn)檢 疫口岸實(shí)驗(yàn)室提供方法, 以滿足轉(zhuǎn)基因大豆的監(jiān)管 需求。
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