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1. 預(yù)期用途

用于基于核酸的檢測(cè)的 HPV DNA 基因型 HPV31、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58 的第一國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)集合由 5 個(gè)單獨(dú)的冷凍干燥重組質(zhì)粒制備物組成，該重組質(zhì)粒含有規(guī)定基因型的全長(zhǎng) HPV DNA。

克隆詳細(xì)信息可在每個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的特定使用說(shuō)明中找到（NIBSC 代碼分別為 14/258、14/260、14/104、14/262、14/264）。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)都在純化的人類(lèi)基因組 DNA 的背景下配制，凍干成 0.5 ml 等分試樣并儲(chǔ)存在 -20 °C。這些材料在一項(xiàng)涉及 15 個(gè)實(shí)驗(yàn)室的國(guó)際合作研究中進(jìn)行了表征（WHO/BS/2019.2360）。

2. 注意

該制劑不適用于人類(lèi)食物鏈中的人類(lèi)或動(dòng)物。

該材料含有來(lái)自人類(lèi)胎盤(pán)的 DNA (Sigma, D7011)。與所有生物來(lái)源的材料一樣，這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄它。此類(lèi)安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開(kāi)安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免割傷。

NIBSC 19/226 人乳頭瘤病毒(WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品)

3. 單元

第一國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定單位：

HPV31 DNA (14/258) 為每安瓿 1.6 x 10^7 國(guó)際單位 (IU)；

HPV33 DNA (14/260) 為每安瓿 1.6 x 10^7 IU；

HPV45 DNA (14/104) 為每安瓿 1 x 10^7 IU；

HPV52 DNA (14/262) 為每安瓿 7.9 x 10^6 IU；

HPV58 DNA (14/264) 為每安瓿 7.9 x 10^6 IU。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國(guó)：英國(guó)。

每個(gè)安瓿含有凍干的 0.5 mL HPV 質(zhì)粒 DNA，稀釋在 10 mM Tris 緩沖液 pH7.4 中，含有 1 mM EDTA、5 mg/mL 海藻糖和源自胎盤(pán)的人 DNA (~1 x 10^6 GEq/mL)。

5. 存儲(chǔ)

安瓿瓶在收到時(shí)應(yīng)儲(chǔ)存在 -20 °C 或以下。

請(qǐng)注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性，NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。

6. 開(kāi)瓶指南

DIN 安瓿瓶有一個(gè)“易開(kāi)”顏色的壓力點(diǎn)，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類(lèi)型的安瓿破碎機(jī)可商購(gòu)獲得。要打開(kāi)安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說(shuō)明進(jìn)行操作。

NIBSC 19/226 人乳頭瘤病毒(WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品)

7. 材料的使用

在重組之前，不應(yīng)嘗試稱(chēng)量?jī)龈刹牧系娜魏尾糠?。HPV DNA 的第一個(gè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)都包含高拷貝數(shù)模板。打開(kāi)玻璃安瓿時(shí)，通過(guò)霧化污染 HPV 質(zhì)粒 DNA 的風(fēng)險(xiǎn)很高。材料必須在單獨(dú)的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中打開(kāi)和處理，遠(yuǎn)離其他預(yù)擴(kuò)增組件，如試劑、實(shí)驗(yàn)室器具和樣品。

該材料以?xún)龈尚问教峁?，使用前?yīng)在 0.5 ml 無(wú)菌無(wú)核酸酶水中復(fù)溶。確保安瓿的內(nèi)表面被添加的水潤(rùn)濕，以便重組粘附在玻璃上的任何凍干材料顆粒。當(dāng)按照指示重組時(shí)，

14/258 (HPV31) 的終濃度為 3.2 x 10^7 IU/mL；

14/260 (HPV33) 的終濃度為 3.2 x 10^7 IU/mL；

14/104 (HPV45) 的終濃度為 2 x 10^7 IU/mL；

14/262 (HPV52) 的終濃度為 1.6 x 10^7 IU/mL；

14/264 (HPV58) 的終濃度為 1.6 x 10^7 IU/mL。

重組材料適用于校準(zhǔn)內(nèi)部或工作標(biāo)準(zhǔn)，用于擴(kuò)增和檢測(cè) HPV DNA（WHO/BS/2019.2360）。該材料不得用于校準(zhǔn)或評(píng)估提取、沉淀或離心程序。 NIBSC 可以為在提取步驟無(wú)法與擴(kuò)增步驟分離的分析中使用 HPV DNA 基因型國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（例如進(jìn)樣、應(yīng)答平臺(tái)）提供指導(dǎo)。該材料尚未針對(duì)人類(lèi) DNA 核酸擴(kuò)增技術(shù)進(jìn)行校準(zhǔn)。