產(chǎn)品名稱:NIBSC 16/120 世衛(wèi)組織第一次基因組國際參考小組JAK2V617F
英文名稱:WHO 1st International Reference Panel for Genomic JAK2 V617F
品牌:WHO國際標(biāo)準(zhǔn)品NIBSC
類別:國際標(biāo)準(zhǔn)
產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 銷售價(jià) | 您的折扣價(jià) |
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16/120 | 1支 | 8周 | 6300 | 立即咨詢 |
1. 預(yù)期用途
該面板包括七個(gè)單獨(dú)編碼的安瓿,每個(gè)安瓿含有從人類細(xì)胞系中提取的凍干純化基因組 DNA。每個(gè)主要標(biāo)準(zhǔn)品/安瓿瓶都有不同的 JAK2 V617F 定義值,作為總 JAK2 (NM_004972.3) 的百分比。該面板旨在用作校準(zhǔn) JAK2 V617F 檢測(cè)的二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)、分析和試劑盒的主要標(biāo)準(zhǔn)。這些材料不用作運(yùn)行控制。這些材料由外部實(shí)驗(yàn)室測(cè)試,通過在等位基因特異性 (AS)-QPCR、數(shù)字 PCR、基于等位基因歧視的終點(diǎn) PCR(包括 AS-PCR、擴(kuò)增難治性突變系統(tǒng)-PCR (ARMS- PCR)和基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間(MALDITOF)質(zhì)譜分析)和下一代測(cè)序。
該小組由世界衛(wèi)生組織 (WHO) 生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會(huì)于 2016 年成立,作為 WHO 第一個(gè)基因組 JAK2 V617F 國際參考小組,NIBSC 代碼 16/1201. 這些材料不得用于任何其他用途。數(shù)據(jù)分析必須集中在 JAK2 基因座上。不得嘗試識(shí)別源材料捐助者。
2. 注意
該制劑不適用于人類或動(dòng)物人類食物鏈。
對(duì)用于制備該組的細(xì)胞系進(jìn)行了測(cè)試,通過 PCR 發(fā)現(xiàn)其對(duì) HIV1、HTLV1、HBV 和 HCV 呈陰性。在小組的制備中使用了一種 Epstein Barr 病毒 (EBV) 轉(zhuǎn)化的類淋巴母細(xì)胞系。 EBV 是英國危險(xiǎn)病原體咨詢委員會(huì)分類的第 2 類病原體。 EBV 序列可能存在于這些材料中,但 DNA 是使用蛋白質(zhì)變性和去除的方案制備的,因此可能使病毒失活。但是,不能消除活病毒存活的可能性。與所有生物來源的材料一樣,這種制劑應(yīng)被視為對(duì)健康有潛在危害。應(yīng)根據(jù)您自己實(shí)驗(yàn)室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護(hù)手套和避免產(chǎn)生氣溶膠。打開安瓿或小瓶時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎,以免割傷。
3. 單元
該小組在一項(xiàng)涉及 29 個(gè)實(shí)驗(yàn)室和 38 種測(cè)試方法的國際合作研究中進(jìn)行了測(cè)試。獲得了以下 JAK2 V167F 占總 JAK2 百分比的中值;材料 15/170 的共識(shí)值低于預(yù)期(與內(nèi)部液滴數(shù)字 PCR 數(shù)據(jù)相比)。值得注意的是,在材料 15/170 的 27 種(統(tǒng)計(jì)上合適的)定量方法中,5 種方法報(bào)告的平均值為 0%,這可能是由于該方法的檢測(cè)限或低采樣頻率的降低。水平目標(biāo)。僅來自數(shù)字 PCR 方法的結(jié)果 (n = 6),所有這些方法都報(bào)告了大于 0% 的值,顯示平均值為 0.04% JAK2 V617F (±0.01%;95% 置信區(qū)間)。與材料 15/172(0% JAK2 V617F)相比,材料 15/170 明顯對(duì) JAK2 V617F 呈陽性。
4. 內(nèi)容
生物材料原產(chǎn)國:英國和德國。
該面板包括七個(gè)單獨(dú)編碼的安瓿,每個(gè)安瓿含有大約 5 μg 從人類細(xì)胞系中提取的凍干純化基因組 DNA。使用“鹽析”方法提取基因組 DNA,以不同的比例組合以產(chǎn)生一系列 JAK2 V617F 值占總 JAK2 的百分比,并在冷凍干燥前用 5mg/ml 海藻糖在 Tris-EDTA 緩沖液中稀釋。
5. 存儲(chǔ)
將所有未開封的凍干材料安瓿存放在 -20°C 或以下。
請(qǐng)注意:由于凍干材料固有的穩(wěn)定性,NIBSC 可能會(huì)在環(huán)境溫度下運(yùn)輸這些材料。
6. 開店指南
DIN 安瓿瓶有一個(gè)“易開”顏色的壓力點(diǎn),窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連。各種類型的安瓿破碎機(jī)可商購獲得。要打開安瓿,輕輕敲擊安瓿以收集底部(標(biāo)記)端的材料,并按照安瓿破碎器隨附的制造商說明進(jìn)行操作。
7. 材料的使用
在重新配制之前,不應(yīng)嘗試稱量凍干材料的任何部分
a。如上文第 6 節(jié)所述打開安瓿瓶。
b。在室溫下用 100 μl 無核酸酶水復(fù)溶每種凍干材料,在 1x Tris EDTA 緩沖液(10mM Tris,1mM EDTA)中得到純化的基因組 DNA。
C。使用移液器將每個(gè)安瓿的全部內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到無核酸酶管中。
d。讓材料在室溫下復(fù)溶 1 小時(shí),并在使用前用移液管充分混合。
e.使用前測(cè)量DNA濃度;將所需的量添加到您的檢測(cè)中。
F。如果將標(biāo)準(zhǔn)用于測(cè)定校準(zhǔn)目的,請(qǐng)確定通過分析這些標(biāo)準(zhǔn)的觀察值與預(yù)期值,為您的 JAK2 V617F 測(cè)定校正系數(shù)。有關(guān)更多詳細(xì)信息,請(qǐng)參閱第一個(gè) WHO 國際遺傳參考小組對(duì) BCR-ABL1 易位定量的建議校準(zhǔn)方法
G。如果您正在校準(zhǔn)二級(jí)標(biāo)準(zhǔn),請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的同時(shí)測(cè)試此基因組 DNA,并應(yīng)用相關(guān)的校正因子。有關(guān)詳細(xì)信息,請(qǐng)參閱第一個(gè) WHO 國際遺傳參考小組對(duì) BCRABL1 易位定量的建議校準(zhǔn)方法
H。強(qiáng)烈建議在當(dāng)天使用該材料重組,不儲(chǔ)存。然而,內(nèi)部分析確定重組凍干基因組 DNA 在 +4°C 下至少穩(wěn)定 4 天(或在 -20°C 下 2 個(gè)月)。應(yīng)注意避免與其他樣品交叉污染。