產(chǎn)品名稱:IRMM-311 地衣芽孢桿菌的基因組DNADSM5749
英文名稱:Genomic DNA of Bacillus Licheniformis DSM 5749
品牌:歐洲標(biāo)準(zhǔn)局ERM標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)
運(yùn)輸信息:冰包
類別:標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)
產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 銷售價(jià) | 您的折扣價(jià) |
---|---|---|---|---|
IRMM-311 | vial | 4周 | 1640 | 立即咨詢 |
IRMM-311 地衣芽孢桿菌基因組標(biāo)準(zhǔn)品樣品描述每個(gè)小瓶包含一個(gè)瓊脂糖插入的地衣芽孢桿菌DSM 5749未消化的基因組DNA,用于PFGE。
本CRM旨在用于PFGE公司授權(quán)的益生菌飼料添加劑地衣芽孢桿菌DSM 5749的分類鑒定。所有程序中均應(yīng)使用分子生物學(xué)級(jí)(無菌、無DNA酶、RNA酶)消耗品和生物化學(xué)物質(zhì)。
用SfiI限制性內(nèi)切酶消化瓊脂糖插入物
-將IRMM-311的瓊脂糖插入物轉(zhuǎn)移到含有1 mL 10 mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH 7.6)的1.5 mL試管中,并在室溫下孵育30 min。
-取出溶液,再加入1 mL 10 mmol/L Tris-HCl緩沖液(pH 7.6),在室溫下再次孵育30 min。
-在不破壞插頭的情況下刪除解決方案。
-在室溫下插入兩次30 min的0.5 mL RE緩沖液中(使用RE和制造商選擇的適當(dāng)緩沖液)。更新中間位置之間的限制緩沖區(qū)。
-刪除限制性緩沖區(qū)。
-添加到每個(gè)插入物:30μL 10×濃縮SfiI緩沖液,30 U SfiI,添加水到最終體積為300μL。
-在50°C下孵育15-17小時(shí)。
-小心除去溶液,加入1 mL ES溶液(0.5MEDTA pH 8.0,1%(m/v)月桂酰肌氨酸鈉)。
-在50下孵育過夜°C.
-取出溶液,加入250μL ESP(含蛋白酶K的ES,1 mg/mL)。
-在50時(shí)孵育2小時(shí)°C.-稀釋三硼酸鹽-EDTA(TBE)緩沖液(89 mmol/L三硼酸鹽,2 mmol/L EDTA,pH 8.3),例如SigmaT7527,與體積比為1:3的蒸餾水(緩沖液:水)。
-除去溶液,加入1 mL稀釋的TBE緩沖液,在室溫下孵育1小時(shí)。插入物可以在4°C中保存幾天。
-取每個(gè)PFGE標(biāo)準(zhǔn)品D2291和D2416的1 mm瓊脂糖插入片,在1 mL稀釋的TBE中室溫孵育1小時(shí)。
存儲(chǔ)
IRMM-311 地衣芽孢桿菌基因組標(biāo)準(zhǔn)品樣品在使用前應(yīng)存儲(chǔ)在4°C下。然而,歐盟委員會(huì)不能對(duì)在客戶的場所儲(chǔ)存材料期間發(fā)生的變化負(fù)責(zé),特別是對(duì)打開的樣品。